精講精練——線粒體的觀察

（一）目的

認(rèn)識最重要的細(xì)胞器之一線粒體的基本形態(tài)和分布，學(xué)會在光學(xué)顯微鏡下觀察線粒體的技能。

（二）實驗前的思考

線粒體是廣泛存在于動、植物細(xì)胞中的重要細(xì)胞器。它呈短棒形，長0.4～3微米，寬0.3～0.8微米，光學(xué)顯微鏡剛好能看清它的輪廓(光學(xué)顯微鏡分辨率在0.2微米)。線粒體是細(xì)胞內(nèi)糖、氨基酸、脂肪酸最終氧化的場所，所以有“動力工廠”之稱。利用這個性質(zhì)，線粒體可使特異性染料健那綠(Janus green B)保持氧化狀態(tài)，呈藍(lán)綠色，線粒體周圍的細(xì)胞質(zhì)中的健那綠被還原成無色狀態(tài)，從而顯示線粒體。

（三）實驗材料與試劑

1、材料：人的口腔上皮細(xì)胞、洋蔥內(nèi)表皮、幼苗或幼根

2、器具：顯微鏡，載玻片，蓋玻片，消毒牙簽，吸水紙，鑷子；

（四）步驟　　

1.觀察人口腔上皮細(xì)胞線粒體

(1)把清潔的載玻片平放在桌上，滴上數(shù)滴健那綠染液于載玻片中央。

(2)用消毒牙簽的鈍端在自己口腔頰粘膜處稍用力刮取口腔上皮細(xì)胞，均勻地涂到載玻片的染液中。蓋上蓋玻片，四周溢出的染液用吸水紙吸干?！?/span>

(3)5分鐘后用高倍鏡或油鏡觀察，可以看到在接近無色的口腔上皮細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中，特別是在細(xì)胞核周圍，散布著許多被染成藍(lán)綠色的短棒狀或顆粒狀結(jié)構(gòu)，即為線粒體。

（五）注意事項

健那綠染液濃度不宜過高，染色時間不宜太長，否則細(xì)胞質(zhì)會重新氧化成有色狀態(tài)而不能充分還原染料成無色狀態(tài)。

（六）分析和討論

真核細(xì)胞內(nèi)一般都存在線粒體，但存在的數(shù)量相差較大。動物細(xì)胞中的心肌細(xì)胞和肝臟細(xì)胞中線粒體數(shù)量最多；植物細(xì)胞中幼苗和貯藏組織的細(xì)胞中線粒體較多。選取植物細(xì)胞的材料應(yīng)該避免組織堅硬、細(xì)胞壁厚老及富含葉綠體的材料，宜選黃化幼苗或新鮮、生長勢旺的組織。

思考題7：線粒體辨認(rèn)的依據(jù)是什么？ 

線粒體的形態(tài)多樣，有短棒狀、圓球狀、線形、啞鈴形等。               

思考題8：健那綠染液是一種什么性質(zhì)的染料？使用它染色的結(jié)果是怎樣的？      

健那綠染液是一種專一性染線粒體的活細(xì)胞染料；使活細(xì)胞中線粒體呈現(xiàn)藍(lán)綠色。               

思考題9：健那綠染液是如何配制的？ 

將0.5g健那綠溶解于50mL生理鹽水中，加溫到30~40℃，使其充分溶解。

思考題10：蘚類、黑藻的葉細(xì)胞中也有線粒體，為什么不選作為觀察線粒體的實驗材料？

因為這些材料中有豐富的葉綠體，而葉綠體呈現(xiàn)綠色，影響實驗效果。

思考題11：你用高倍顯微鏡觀察臨時裝片所觀察到的現(xiàn)象是怎樣的？

可以看到藍(lán)綠色的線粒體，細(xì)胞質(zhì)接近無色

撰文：龍安偉 楊佳順

圖片：無

審核：丁勁松

上傳：楊佳順